張懿欣 中山醫學大學
牛樟芝(Antrodia cinnamomea)是台灣特有褐腐菌，只能生長在台灣常綠闊葉樹－牛樟(Cinnamomum kanehirae)的內壁。牛樟芝氣味芳香，味辛苦，子實體富含多醣體與三萜類等成分，有抗B型肝炎與防癌等功效。基於其功效以及野生牛樟芝子實體數量極少，加上人工栽培不易等因素，所以價格昂貴；業者往往為了採取野生牛樟芝而大肆盜伐牛樟樹，使臺灣特有珍貴樹種瀕臨滅絕，破壞森林多樣性與生態平衡。
本實驗室之研究以建立藥用牛樟芝人工培養技術及篩選並應用研發藥用牛樟芝成分抗癌活性相關產品為主要研究目的。第一階段以嘉義大學林產科學系與森林暨自然資源學系為主，研發並建立最佳之牛樟芝人工培養條件與技術。第二年則由中山醫學大學和弘光科技大學負責，以醫學生物角度出發，分析鑑定第一階段實驗室之人工栽培牛樟芝抗癌活性功效的成分。此外，本實驗室也探討靈芝與與黑木耳萃取液之抗癌活性，並比較此兩種菇類與牛樟芝之抗癌活性。研究結果顯示，最佳樟芝菌絲體人工培養基為含有8 g/L瓊脂濃度之MPA配方；而最佳之培養生長條件為中性或
弱酸性pH值，培養溫度為30℃。本實驗室並首度發現添加米糠可有效促進樟芝在太空包培育中的生長，而且樟芝可在含有相思樹配方的太空包基質中形成原質。
本實驗室利用細胞生長曲線、DNA斷裂分析與癌細胞在半固態培養基上的群落分析等研究法多方面探討人工栽培樟芝的功效。樟芝發酵液、樟芝水萃物與樟芝甲醇萃取物都可抑制人類H1299肺癌細胞株、HepG2肝癌細胞株與CaCO2大腸結腸癌細胞株的生長；但以樟芝發酵液抑制癌細胞生長的效果較佳。抑制癌細胞生長之活性比較，以樟芝發酵液的抗癌功效最佳，其次為樟芝甲醇萃取物、靈芝水萃物、黑木耳水萃物與樟芝水萃物。
本實驗室也利用DNA斷裂分析探討上述萃取物是否可誘發癌細胞之細胞自戕作用(apoptosis)，達到抑制癌細胞生長的效果。實驗結果顯示樟芝發酵液、樟芝水萃物與樟芝甲醇萃取物都可以使H1299、HepG2與CaCO2之DNA產生斷裂，其中又以樟芝水萃物與甲醇萃取物誘發癌細胞DNA 斷裂的情形較為顯著。而癌細胞在半固態培養基的群落分析方面，H1299在含有樟芝發酵液、樟芝水萃物與樟芝甲醇萃取的半固態培養基中，隨著發酵液與萃取物濃度增高，細胞株群落形成數隨之遞減；但高濃度樟芝發酵液與樟芝水萃物可完全抑制H1299在半固態培養基中形成細胞株群落。
綜合本實驗室上述實驗結果，樟芝發酵液抑制癌細胞生長功效較佳；由DNA斷裂分析得知樟芝水萃物與甲醇萃取物則可較有效地誘發癌細胞之細胞自戕作用，而樟芝發酵液與樟芝水萃物則可有效抑制癌細胞在半固態培養基中形成細胞群落的活性。
本實驗室之研究成果不但已建立牛樟芝的最佳人工栽培條件與技術，並已證實在實驗室利用人工栽培之牛樟芝具有抗腫瘤細胞生長與誘發細胞自戕作用的活性。未來本實驗室將以上述實驗結果為基礎，進一步探討人工栽培牛樟芝抗癌活性與增進人體免疫作用之作用機制，同時也將分析其活性成分，研發相關之抗癌保健產品。
關鍵字：牛樟芝、人工栽培、樟芝萃取液、抗癌活性成分分析
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