張德卿 國立中正大學
人類多瘤性病毒，BK病毒（BKV），屬於DNA病毒。BKV於腎臟組織再活化，常導致腎臟移植病人腎衰竭，即為多瘤性病毒相關腎病變（Polyomavirus-associated nephropathy，PVN）。截至目前為止，仍缺乏有效抗BKV的藥物，本研究計畫的目的即在於尋找有效抑制BKV活性的中藥，以提供治療PVN的新藥物。實驗先以抑制BKV VP1類病毒殼體血液凝集，篩選可能具有抑制BK病毒與細胞受體結合能力之中藥，再以免疫螢光染色確認中藥處理後，BKV感染細胞後病毒蛋白質表現。同時以溶劑梯度沖提分析中藥之圖譜，確認分離中藥的較佳條件；接著收集不同部分之中藥分離物，測定其血液凝集抑制活性，以作為後續分離鑑定中藥之依據。
結果顯示紅景天、枸杞、白芍、黃芩及山楂，可抑制BK VP1類病毒殼體血液凝集活性。經由免疫螢光染色，確認紅景天及山楂，具有明顯抑制病毒蛋白質表現之活性。
為了探討鑑定紅景天及山楂之有效成分，以不同極性溶劑沖提分離其成分物質，HAI結果顯示無論以不同濃度甲醇、或乙酸乙酯及正丁醇萃取，紅景天及山楂之有效成分均位於水萃取層；再以5-50%乙晴分離此水萃取層中紅景天及山楂之有效成分，結果顯示此部分純化之20%乙晴萃取物具有最高之HAI活性，且濃度分別增加了128及2048倍HAI。未來我們將繼續以不同溶劑及管柱分離純化紅景天及山楂之20%乙晴萃取物中的有效成分，並搭配NMR，2D-NMR，IR，UV，ESI-Mass，Element Analysis等方法決定其構造式。接著以LiChrospher 100 RP-18e層析管柱，移動相TFA-CH3CN的條件，以不同比率之甲醇濃度沖提分離紅景天及山楂萃取物，繼續以抑制血液凝集試驗分析。
結果顯示80:20之甲醇濃度時有較佳的血液凝集抑制活性。因此紅景天及山楂抑制BKV與細胞受體結合的成分可能位於此分離物中。我們將繼續分離鑑定此物質，以其找到有效抑制BKV感染的中藥，作為臨床治療PVN用藥之新選擇。
關鍵字：BK病毒，多瘤性病毒腎病變，中藥抗病毒
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